丙酮酸激酶（PK）测试盒的操作过程
发布时间:2023/12/4 9:02:38 已浏览次数: 117 次

 丙酮酸激酶（PK）测试盒的操作过程

(测血清、血浆、组织)

一、测定原理：

丙酮酸激酶（pyruvate kinase. PK）在 ADP 存在下可

催化 PEP 产生丙酮酸，丙酮酸再由 LDH 将其转变为乳

酸，同时将 NADH 变为 NAD。

二、试剂组成与配制：（50 管/48 样）

试剂一：液体 60mL×1 瓶，4℃保存。

试剂二：粉剂×2 支，-20℃保存，每支用时加双蒸水

1.4mL，用不完放-20℃以下保存 3～7 天。(如

果你的样本量少，可以将配好的 1.4mL 再分

成 2～3 管放-20℃以下保存，每次取一管用，

以免反复冻融)

试剂三：液体×4 支，4℃保存，不可冷冻，用不完的仍

放 4～8℃保存。

试剂四：粉剂×4 支，-20℃保存，用时每支加双蒸水

320µL，用不完放-20℃以下保存。

试剂五：粉剂×4 支，-20℃保存，用时每支加双蒸水

650µL，用不完放-20℃以下保存。

三、操作过程:

1、样本前处理：

①、血清（浆）样本：直接检测。

②、组织样本：准确称取组织重量按重量（g）

:体积（mL）

=1:9 的比例，加入 9 倍体积的生理盐水，冰

水浴条件下机械匀浆，制成 10%匀浆，2500

转/分，离心 10 分钟，取上清再用生理盐水

稀释成适当浓度匀浆上清待测（请做 1～2

个浓度的预试验）。（取得的上清液需测蛋白

浓度，蛋白定量试剂盒本所有售）

2、操作表：

 丙酮酸激酶（PK）测试盒的操作过程