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尼氏染色(焦油紫法)实验检测
服务介绍:
尼氏染色,也称为焦油紫染色,是一种用于显示神经元和神经胶质细胞中尼氏体(Nissl bodies)的染色方法。尼氏体是神经元细胞质中的粗面内质网和游离核糖体,富含RNA,在神经元中具有重要的功能。
染色原理:
尼氏染色法采用碱性染料焦油紫(Cresyl violet)对神经组织进行染色。尼氏体(Nissl body)或称尼氏小体,是分布于神经细胞胞质内的三角形或椭圆形小块状物质,能被碱性染料如焦油紫、亚甲蓝、甲苯胺蓝、硫堇等染成紫蓝色。尼氏体是神经元内合成蛋白质的重要部位,当神经元受到刺激后,尼氏体会发生变化,如数量减少或溶解。通过尼氏染色,可以观察神经元的形态结构和尼氏体的变化,从而判断神经元的健康状态。
注意事项:
1、组织固定:尼氏体离体后容易溶解,因此组织取出后应立即进行固定处理,以防止尼氏体溶解导致难以着色。
2、切片厚度:切片厚度对染色效果有很大影响。切片过厚可能导致染色不均或背景过深;切片过薄则可能使尼氏体结构不清晰。因此,在切片时应根据实验需求选择合适的切片厚度。
3、染色与分化:染色和分化时间对染色效果至关重要。染色时间过短可能导致尼氏体着色不深;染色时间过长则可能导致背景过深。分化时间也需要严格控制,以避免过度分化导致切片颜色全部脱掉。
4、安全与防护:焦油紫具有感光作用,操作时应避免阳光直射。同时,实验人员应穿实验服并戴一次性手套进行操作,以防止染料对皮肤和眼睛造成刺激或伤害。
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